在人们通常的概念中，光合作用只是植物的“专利”，而动物们只能依靠吃掉植物获取光合作用所生成的物质和储存的能量。不过世界之大无奇不有，很多动物也获得了“晒太阳就填饱肚子”的能力。例如，珊瑚和海绵的体内就分别寄生着虫黄藻和绿藻。而后者通过光合作用所产生的有机物，可以供给前者用来生长。然而在这两个例子中，动物们都需要借助完整的植物细胞来达到这一目的，充其量只能算作“共生”。

珊瑚内共生的虫黄藻。图片：Todd LaJeunesse

但是，在一种名为绿叶海天牛（Elysia chlorotica）的海蛞蝓体内，实现了真正意义上的“光合作用”。它依靠摄食获取了本身属于藻类的叶绿体，将其置于自己的细胞内进行光合作用，而更令人震惊的是，为了让这些叶绿体更好的工作，它甚至还“夺取”了原属于藻类细胞核中的基因。

光合作用我也能

早在19世纪后期，人们就发现绿叶海天牛在取食一种称作滨海无隔藻（Vaucheria litorea）的藻类后，它的身体会逐渐变绿。显微镜观察显示，在它分支状的消化系统细胞内，居然出现了类似叶绿体的绿色颗粒结构。而后续的观察的确证明，这些绿色的颗粒的确就是来源于滨海无隔藻的叶绿体。

绿叶海天牛是如何获得原属于滨海无隔藻的叶绿体的呢？通过对它详细生活史的研究，才解开了这一谜团。当绿叶海天牛的幼虫（称作担轮幼虫）从卵中孵化之后，会游动着寻找滨海无隔藻，一旦找到就攀附在其上，并迅速变态发育成为幼年的绿叶海天牛。此时，它的身体还是无色的。而一旦幼年的绿叶海天牛开始啃食无隔藻，不出24小时它的身体就逐渐变绿，并最终稳定下来^[1]。可见，这些叶绿体都是在取食的过程中，从破碎的滨海无隔藻细胞中“提取”出来，并放置于消化道细胞之中的。科学家们给这些叶绿体起了一个特殊的名称，叫做“盗食质体”（kleptoplasty），以表明它的来源特性。

绿叶海天牛和它所取食的无隔藻。图片：参考文献2

绿叶海天牛不会无缘无故的获取这些叶绿体，这些叶绿体必然有它的用处。人们发现，当绿色的绿叶海天牛只要在有光的条件下，就能“忍饥挨饿”长达10个月——这相对于其一年左右的寿命来说，实在是有些长。而更为令人震惊的是，通过对绿叶海天牛的生理学测定，人们发现它和植物一样能够进行二氧化碳的固定和氧气的释放。人们有理由相信，绿叶海天牛获取这些叶绿体的真正目的，是依靠它们来进行光合作用，并利用光合作用产物为自己所用。这一假设，在随后的多个观察和实验中得到了证实。这些发现，让绿叶海天牛成为了动物界中独树一帜的“真·光合作用动物”。

若要叶绿体寿命长，须要核基因来帮忙

不过，要从取食的藻类中获得叶绿体并不困难。真正的困难之处，在于维持这些“夺”来的叶绿体能够长期稳定的存在。

从绿叶海天牛的生活史可以看出，它体内的叶绿体来源于摄食，在卵和幼虫期间并不存在，并且也没有任何观察表明这些叶绿体会在绿叶海天牛体内进行分裂和增殖。这就意味着一条开始依靠光合作用“辟谷”的绿叶海天牛，其体内的叶绿体都来自于早期的摄食。

然而，叶绿体内充斥着各种“易耗品”——负责执行光合作用的各种蛋白，需要不断的合成和补充，才能维持它的功能。但是，叶绿体所需要的蛋白，并不能完全由叶绿体本身合成。我们知道，叶绿体有自身的基因组和蛋白合成系统，然而它们并不完整——叶绿体很多必需蛋白的合成基因，已经转移到了细胞核基因组中。如果没有核基因的参与，独立的叶绿体会由于多种功能性蛋白的损耗而迅速失去活性^[3]。

绿叶海天牛、其体内的叶绿体以及叶绿体中维持其功能所需的蛋白。用蓝色标出的蛋白都是需要依靠细胞核进行编码的。图片：参考文献1

事实上，在绿叶海天牛的一些近亲中，也能获取藻类的叶绿体，但它们都必须持续的啃食藻类，来更新体内消耗的叶绿体。唯有绿叶海天牛，在取食之后就能离开滨海无隔藻，长期保持“辟谷”状态，同时依然维持叶绿体的功能。然而，绿叶海天牛在啃食滨海无隔藻时只保留了叶绿体，而包括细胞核在内的其他结构都被破坏消失掉了，那么，如何在如此长的时间内，维持这些叶绿体的稳定和功能呢？一些科学家们大胆猜想：也许，原本在藻类细胞核中的叶绿体蛋白基因，存在于绿叶海天牛的细胞核。换句话说，绿叶海天牛，不仅夺取了滨海无隔藻的叶绿体，同时还夺取了它的核基因！

夺取的藻类核基因

这一猜想并非无源之水。因为在对绿叶海天牛基因的研究中，科学家们已经发现通过PCR手段，能够从绿叶海天牛的DNA中克隆出属于滨海无隔藻的编码叶绿体蛋白的核基因。由于有人质疑这是绿叶海天牛消化道中滨海无隔藻残渣的影响，科学家们又检测了绿叶海天牛体内的这些滨海无隔藻核基因表达产生的RNA，结果显示，这些RNA的确存在。而随后，通过对绿叶海天牛和滨海无隔藻完整转录组的分析发现，在绿叶海天牛体内，表达了52个滨海无隔藻的核基因，而且其中相当多的基因都与光合作用相关^[4]。

其实到了这里，已经有相当多的证据表明滨海无隔藻的核基因转移到了绿叶海天牛细胞核内，并且进行了表达。不过科学研究并非一路坦途，各种质疑必然会出现。例如有研究指出，通过对其他几种也能获取藻类叶绿体的海蛞蝓进行转录组分析后，没有发现有表达的藻类核基因。而另一项研究指出，通过对绿叶海天牛和滨海无隔藻的基因组测序数据分析，发现并二者并没有“共享”的核基因，尤其是在卵中没有发现滨海无隔藻的基因^[5,6]。

因此在最近的研究中^[7]，为了进一步考察滨海无隔藻的核基因是否真的转移到了绿叶海天牛的基因组内，特别是是否存在于尚未开始摄食的幼虫基因组中，科学家们采用了一种名为“荧光原位杂交”（Fluorescence in situ Hybridization，FISH）的技术进行检测。这项技术的原理是用一段特定的藻类核基因的单链片段作为探针，依靠DNA碱基互补配对的原则，来检测绿叶海天牛的基因组上是否具有相同的片段。如果有，那么单链的探针就会和绿叶海天牛基因组紧密结合，进而显示出荧光信号。科学家选择了一个名为prk的基因作为探针使用。之所以选择这一基因，是因为它是滨海无隔藻的核基因，而且其所编码的磷酸核酮糖激酶专一性的参与光合作用过程，此外更重要的是，在目前已知的所有不能进行光合作用的生物体中，都不存在这一基因。

FISH实验结果表明在绿叶海天牛的基因组中存在滨海无隔藻的核基因。图片：参考文献7

实验结果表明，在绿叶海天牛幼虫的染色体上，的确检测到了荧光信号，而且荧光信号还成对存在于姐妹染色单体上。通过这一细胞生物学实验，从细胞水平进一步证明了滨海无隔藻的核基因的确转移到了绿叶海天牛的基因组中，并且能够通过卵遗传给下一代。此外，作者也指出，之前基因组测序得出的“阴性”结果，很可能是基因组数据不完整造成的；而转录组数据分析得出的“阴性”结果，则体现了不同海蛞蝓物种间的分化。

基因横向转移，让生物界更精彩

动物获取原本属于植物的基因，这看起来似乎有些不可思议，但实际上，这一过程是现实存在的。由于这种基因的转移过程，不同于依赖生殖细胞的亲代-子代式的“垂直传递”，因此被命名为“水平基因传递”（Horizontal gene transfer，HGT）。

在生物演化史上，最有名的HGT过程，莫过于线粒体的产生。线粒体是几乎所有真核细胞所具有的细胞器，它能进行有氧呼吸，从而为细胞提供能量。然而，最早期的线粒体，是一种独立生活的、能够进行有氧呼吸的原核生物。真核生物的祖先在吞噬它后，并没有将它消化，而是和它形成了一种奇妙的联盟：真核细胞为它提供有氧呼吸所需的有机物，而它则为真核细胞提供能量。在漫长的演化过程中，线粒体基因组上有相当多的基因通过HGT过程转移到了真核细胞的核基因组上，使得二者的关系更为密不可分。与此类似的是，植物中的叶绿体，也来源于一类被吞噬的光合细菌。这，就是著名的“内共生起源学说”。

叶绿体的若干次内共生起源和伴随的HGT事件。图片：参考文献1

在地球生物演化历史中，HGT并非是稀有事件，我们今天看到的绿叶海天牛和滨海无隔藻之间的HGT，或许就是HGT的又一次活生生的例证。通过与其他同样能获取藻类叶绿体、但缺乏相应核基因的海蛞蝓进行对比，我们可以大致整理出一个绿叶海天牛和滨海无隔藻间发生HGT的脉络：或许在最早期，这些海蛞蝓的共同祖先只是单纯的以藻类为食，但随后，一些海蛞蝓学会了从藻类中获取叶绿体来提供部分能量，供给其生理活动。但此时，它们仍需要不断的取食藻类，以更新体内的叶绿体。而到了绿叶海天牛，它从被破碎的滨海无隔藻细胞核中摄取了DNA，并整合到自己的基因组中，以此获得了不需要持续摄食就能长期维持叶绿体功能的能力。这使得它能够摆脱食物的限制，更有效的进行繁殖等活动。

更有意思的是，在这一对组合中作为基因供体的滨海无隔藻，它的叶绿体居然也是两次内共生和HGT的产物：第一次HGT发生于前面说过的所有植物叶绿体的起源过程，这一过程诞生了所有绿色植物的祖先绿藻，以及其他多种真核藻类；而第二次则发生于滨海无隔藻祖先的起源：作为真核藻类一支的红藻，其中一种原始红藻又被另一类真核细胞所吞噬，并将基因转移到宿主的基因组内，从而形成了滨海无隔藻的祖先^[1]。由此看来，绿叶海天牛所获得的滨海无隔藻的核基因，恐怕算是“三手基因”了。

在生物演化过程之中，出现了多次HGT事件，使得“演化之树”变成了“演化之网”。图片来源：Nature Reviews Microbiology

那么，为什么会产生HGT呢？科学家们依然对此不甚了解。一种较为显而易见的解释是，在内共生的过程中，宿主细胞获取寄生细胞的基因，可以增加对寄生细胞的控制性，并加强二者的合作关系。而另一种可能的解释是，HGT的发生可以增加宿主细胞基因组的多样性，从而为产生更多具有新功能的基因提供“原料”。而实验数据也表明，转移到核基因组中的线粒体基因和叶绿体基因中，有很多已经产生了全新的功能。这一过程，对于基因组较为简单的早期生物体来说，这是促进演化的重要动力。不过在基因组更为复杂、同时具有复杂组织器官分化的后期生物体内，HGT的“戏份”大大下降，演化的“原料”主要靠基因组的变异和重组来实现。

当然，这些解释，还无法解答所有HGT的谜团，诸如HGT具体的实现机制如何、HGT是否具有基因选择性等问题，仍然有待人们的探索。但毫无疑问的是，作为这一代表的绿叶海天牛和滨海无隔藻，将是回答这些问题的一把金钥匙。（编辑：老猫）

参考文献

1. Rumpho ME et al (2011) The making of a photosynthetic animal. The Journal of experimental biology 214(2):303-311.
2. Green BJ et al (2000) Mollusc-algal chloroplast endosymbiosis. Photosynthesis, thylakoid protein maintenance, and chloroplast gene expression continue for many months in the absence of the algal nucleus. Plant physiology 124(1):331-342.
3. Rumpho ME et al (2008) Horizontal gene transfer of the algal nuclear gene psbO to the photosynthetic sea slug Elysia chlorotica. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 105(46):17867-17871.
4. Pierce SK et al (2012) Transcriptomic evidence for the expression of horizontally transferred algal nuclear genes in the photosynthetic sea slug, Elysia chlorotica. Molecular biology and evolution 29(6):1545-1556.
5. Bhattacharya D et al (2013) Genome analysis of Elysia chlorotica egg DNA provides no evidence for horizontal gene transfer into the germ line of this kleptoplastic mollusc. Molecular biology and evolution 30(8):1843-1852.
6. Wagele H et al (2011) Transcriptomic evidence that longevity of acquired plastids in the photosynthetic slugs Elysia timida and Plakobranchus ocellatus does not entail lateral transfer of algal nuclear genes. Molecular biology and evolution 28(1):699-706.
7. Schwartz JA Curtis NE & Pierce SK (2014) FISH Labeling Reveals a Horizontally Transferred Algal (Vaucheria litorea) Nuclear Gene on a Sea Slug (Elysia chlorotica) Chromosome. Biol Bull 227(3):300-312.