快速蛋白变性剂有哪些?快速让蛋白变性有哪些方案?

目的是制作白内障模型。当前我用的方法是将40%甲醛注射进入猪眼的晶状体中,使蛋白变性,变硬变白,形成类似白内障的效果。但是甲醛的味道太大,寻求其他解决方案。

要求是5-20分钟内可以使大部分的晶状体蛋白变性,形成白色的硬块。挥发性小。低毒。价钱便宜量又足。非管制化学品。

我已经测试过的方案:
* 新洁尔灭,也就是苯扎溴铵。能够使猪眼晶状体蛋白变性,但是缓慢,而且对角膜内皮损伤太大,变性后的晶状体不够硬。优点是新洁尔灭不易挥发,没什么异味。
* 95%乙醇。渗透性太差,局部凝结了很小一块。就不能扩散了。
* 40%甲醛×3+异丙醇*1,据说可以渗透性更好一些。但实际操作来说差不多。
* 84消毒液。试图造成些酸烧伤,应该是凝固性坏死,可是反应太慢,
* 碳酸氢钠。正好手里有些,没什么作用,可能太弱了。
物理方案:
* 微波炉,这是常规方法,有优点有不足。形成的硬核只在晶状体的后极部的位置,太脆。
* 电烙铁+针尖。试图利用针头直接伸到晶状体内加热造成蛋白变性。结果针头散热太快,针尖用手拿着都不够烫。更换成0.5mm的铅笔芯,太脆,容易断,不适合操作。
* 微波炉+铅笔末。希望石墨能够增强点微波的效果。没有显著性差别。
* 微波炉+铝箔片。将铝箔片送入晶状体。无显著性差别。加热时间稍微长一点,烧糊了。

求集思广益,选出些候选方法,我去搞上十几个猪眼测试一下。

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8个答案
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O.range化工本科 数据分析

2012-05-07 07:47
支持者: None we_cry

苯酚啊,连瓶子一起放到水槽里化开在用。有低毒

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诺里斯生物工程专业

2012-05-06 20:58
支持者: 冷月如霜

可以试试看SDS,DTT,巯基乙醇。生物上用这些做蛋白质变性剂的。记得做好防护。

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电烙铁+针尖的方法似乎有些改进潜力,因为改起来容易。你用的电烙铁是多少瓦的?
可以考虑一下更大功率的电烙铁加稍粗的铜针……(没有铜针?用细铜轴磨尖了试试。)

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冷月如霜植物细胞生物学博士生

2012-05-07 17:11

直接用醋酸或者其他什么酸行么?

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小穷表观遗传博士生

2012-05-07 19:24

估计只有甲醛了,要不为啥小鼠灌流是用他的。。。 凑合用吧
甲醛够低毒了。。。

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we_cry空间信息与数字技术专业

2012-05-06 19:43

重金属盐。。。比如铅盐之类的。。。

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可不可以把晶状体取出来,变性之后再放回去?或者取出来之后再做一些絮状物质填充进去?
我看白内障手术都可以把晶状体拿出来放进去的嘛...

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老猫分子生物学准博士,天文爱好者

2012-05-07 17:41

变性剂的话,我可以说异硫氰酸胍、尿素之类的不错,不过木有试过它们使蛋白质固化的效果如何呢。

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