转基因时,一定要用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒吗?

高二的生物书说基因拼接时,一定要用相同的限制酶,不然粘性末端对不上,不能组合到质粒里去,但是不能人为地在目的基因两端加上两个碱基序列吗?比如质粒是用G丨ATTC切的,就在目的基因两边加G 和ATTC
CTTA G

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1个答案
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fengfeixue0219植物分子生物学博士

2013-09-14 22:14

1 不一定要用相同的限制酶,用同尾酶可以起到相同的效果。所谓同尾酶,就是识别序列不同,但切出的粘性末端是相同的两个酶。例如SpeI和XbaI就是同尾酶(SpeI 是A|CTAGT,XbaI是T|CTAGA)形成的粘性末端就可以连接。

2 人为合成一段单链序列添加到DNA末端十分麻烦。

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